碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析VIP专享VIP免费

40 卷第 10
2020 10
环 境 科 学 学 报
Acta Scientiae Circumstantiae
Vol.40No.10
Oct.2020
收稿日期2020-09-07 修回日期2020-09-25 录用日期2020-09-25
基金项目国家自然科学基金No. 51178140) ; 城市水资源与环境项目No. 2013DX01
作者简介王欣1978) ,
E-mail86384206@ qqcom*责任作者E-mailrnq@ hitedu.cn
DOI10.13671 / j.hjkxxb.2020.0419
王欣宇
邢德
任南2020碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析
J环境科学学报4010 3703-3709
Wang X YXing D FRen N Q. 2020Effect of carbon source on PNP degradation and biocathode community structure in bioelectrochemical systemJ
Acta Scientiae Circumstantiae4010 3703-3709
对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群
落结构分析
王欣宇
邢德峰
任南琪*
城市水资源与水环境国家重点实验室哈尔滨工业大学哈尔滨 150090
摘要研究不同碳源类型对双室生物电化学反应器biocathode bioelectrochemical systemBES生物阴极biocathode降解对硝基苯酚
p-nitrophenolPNP效能的影响碳酸氢钠和葡萄糖作为碳
研究不同碳源类型BES 反应器效能和生物阴极的微生物群落结构BES
应器效能和 PNP 去除率受到碳源类型的影
以葡萄糖作为碳源PNP 去除率比碳酸氢钠为碳源的去除率在 12 h 24 h 分别提高了约 3
1NaHCO3Glucose PNP 去除速率常数随碳源转换分别从0.022±0.002h10.059±0.009h1减小到0.018±0.001h10.042±
0.002h1PNP 去除率分别下降了 36%6.9%NaHCO3Glucose PNP 降解速率常数在外加电压由 0.5 V 转换为 0 V 时分别下降到0.004±
0.00061h10.007±0.0006h1
再次转换为 0.5 V PNP 降解速率常数升高到0.022±0.002h10.062±0.004h1454-
表明碳源类型阴极微生物群落结构的显著差异以碳酸氢钠为碳源的生物阴极富集 Proteobacteria
而以葡萄糖为碳源的生物阴极
Firmicutes Bacteroidetes 成为优势菌门
关键词生物电化学系统生物阴极微生物群落结构对硝基苯酚降解
文章编号0253-2468202010-3703-07 中图分类X172 文献标识码A
Effect of carbon source on PNP degradation and biocathode community
structure in bioelectrochemical system
WANG XinyuXING DefengREN Nanqi*
State Key Laboratory of Urban Water Resource and EnvironmentHarbin Institute of TechnologyHarbin 150090
AbstractIn order to determine the effect of carbon source on the PNP degradation efficiency and microbial community structure of biocathodethe
sodium bicarbonate and glucose were used as carbon source in the double chamber bioelectrochemical system BES The results showed that the carbon
source altered the performance of reactors and PNP degradation The PNP degradation efficiency used glucose were 3 times and 1 times higher than used
sodium bicarbonate at 12 h and 24 hrespectively The PNP removal rate constant of NaHCO3Glucose reduced from 0.022±0.002h1and 0.059±
0.009h1to 0. 018 ± 0. 001h1and 0. 042 ± 0. 002h1and PNP removal rate decreased 36% and 6. 9% with carbon switchover. The PNP
degradation rate constant of RNaHCO3and RGlucose decreased to 0.004±0.00061h1and 0.007±0.0006h1respectively when the applied voltage was
converted from 0.5 V to 0 Vand the PNP degradation rate constant increased to 0.022±0.002h1and 0.062±0004h1when the applied voltage
was converted to 0.5 V again. Microbial community structures of biocathode were significantly different with different carbon source. Proteobacteria was the
dominant bacteria in the sodium bicarbonate reactorsFirmicutes and Bacteroidetes were the predominant bacteria in the glucose reactors. This study
showed the base technology of PNP degradation in the future.
Keywordsbioelectrochemical systemBES carbon sourcebiocathode microbial community structurep-nitrophenol degradation
1引言Introduction
对硝基苯酚p-nitrophenolPNP作为重要的工
业品或原
广泛的应用于各种合成工业
以由杀虫剂降解产生
因此被美国环保属
EPA 列 为 控 制 优 先 污 染 物 名 Wu et al
2015因其在环
因而对人类的健
康存在巨大的危害Tao et al2013
环 境 科 学 学 报 40
河水
土壤
水和地下水中都检测到了 PNP
由于 PNP 毒性而导致的环境污染问题已经引
起全球的关注因此含 PNP 废水在排放前必须进行
处理
以保护环境和人类的健康
物电化学系统bioelectrochemical system
BES微生物产生不同的化学物质或者能量
Wang and Ren2013) ,
由于这项技术具有高效污
染物去除
易于控制且环境友好的优点
受到了广泛的关注Chen et al2016BES 耦合其
他常规水处理技术已被用于 PNP 降解的研究Shen
et al20122014生物阴极 BES 已被用来降解
PNP验室开展了以碳酸氢钠和葡萄糖作为底
物降解 PNP
发现产物均为对氨基苯酚
能获得较好的降解效Wang et al.20162018
碳是生命必须的元
生物阴极微生物生长需
碳 源
因此碳源对微生物的种类影响很
Toshifumi et al.2008BES PNP 的研究主要
集中在 PNP 浓度
电流密度
底物
水力停留时
和外电阻等的影响Jiang et al2016Shen
et al.2015碳酸盐在生物阴极中是一种低成
碳源
在实验室中葡萄糖也是常用的碳源之一此外
同底物的反应器中
碳源转换和电压转换对
PNP 去除率的影响目前研究很少
研究探讨了碳酸氢钠和葡萄糖为底物
的反应器对 PNP 的降解效能利用双室生物阴极电
化学反应器
研究有机碳源葡萄糖和无机碳源
酸氢钠PNP 降解效能和阴极微生物群落结构的
影响
碳源转换和电压转换对 PNP 去除的影响
BES 应用于 PNP 废水处理工程奠定理论基础
2材料和方法Materials and methods
2.1 反应器的构型
本研究中采H型双室玻璃反应器构建有机
葡萄糖Glucose 和无机碳源碳酸氢钠
NaHCO3BES 反应器以阳离子交换膜
CMI7000Membranes International IncUSA
极室和阳极室
每室有效体积为 300 mL.
刷作为电极
外电阻为 10 Ω
外加电压 05 VAg /
AgCl 电极作为0247 V VS SHE
上海雷
中国固定于阴极室Wang et al2016
2.2 反应器的启动及运行
滨文昌污水处理厂生活污水接种反应
器的阴极和阳极阳极液为 167 g·L1乙酸钠
素母Lu et al2012和微量元素母液Lovley
and Phillips1988溶于 50 mmol·L1磷酸盐缓冲液
KCL 0.13 g·L1NH4CL 031 g·L1Na2HPO44.58
g·L1NaH2PO4245 g·L1阴极液采用人工配
分别以碳酸氢钠和葡萄糖作为碳源
50
mmol·L1磷酸盐缓冲液
加入
素母
加入 20 mg·L1PNP 作为目标
温度为25± 2℃ . 每个反应重复测定 31
次碳源转换和电压换后
反应器恢复 7 d
再进行
试验
2.3 分析和计算
在浓
所有样品均通过 045 μm
过滤电压和阴极电势记录由 Keithley2700 数据记录
Keithley Co.LtdUSA自动采集和保存
间隔为 10 min.电流根据欧姆定律进行计算
PNP 浓度测定采用高效液相色谱法model-
e2695Waters Co.USA) ( Wang et al2018PNP
去除率根据进水和出水 PNP 浓度差值进行计算
pH 值使用 pH PHS-2F
上海雷磁测定
2.4 生物阴极微生物群落结构分析
应器阴极碳刷上生物膜提取总 DNA
DNA 试剂盒PowerSoilMo-BIOUSA提取样品总
DNA
所得的 DNA 进行 454-
焦磷酸高通量测序分析
美吉生物) ,
测序结果通过软件QIIME进行样品
生物信息学分析Wang et al20162018
3结果和讨论Results and discussion
3.1 BES 反应器启动及底物对反应器性能的影响
极电势用来评估反应器启动情
反应器电
且阴极中黄色消失
此时表
BES 反应器生物阴极启动成碳源对 BES
流密度的影响如图 1碳源对阴极
电势影响Glucose NaHCO3具有几乎相同的阴
极电位且变化趋势
在达到稳定时都可达
1.0 V
表明碳源对反应器的性能变化影响不
而反应器中电流具有比较明显的改变0 ~ 20 h
都出现了波动
20 h 后都基本稳定在 0.38
mA 左右
但对于 Glucose 2 h 16 h 存在一个较高
电流峰值
此时间段内 Glucose 的电流要远高于
NaHCO3
最高达到 2.3 mA这表明在 2 h 16 h 这段
时间内 Glucose 具有更多的电子的产生
因而会有
更多的电子用于 PNP 的还原反应
Glucose
高的电化学活性
4073
10 期 王欣宇等碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析
1不同碳源类型下阴极电势和电流
Fig.1 The effect of carbon source on the cathode potential
and current
检测电流和阴极电
对反应器生物阴极出
水的 pH 值也进行了检测尽管阴极进液都使用了
50 mmol·L1PBS
阴极出水的 pH 出现了完全相反
的变化2NaHCO3中的阴极出水 pH 呈碱性
60 h 时达到 74Glucose 阴极出水的 pH 则呈酸
60 h 时为 63产生的主要原因是在 Glucose
阴极微生物代谢产生了小分子挥发性有机
VFAs而使 pH pH 24 h 后会有缓慢
的上升
24 h 葡萄糖已完全被微生物代谢
随后阴极VFAs 为底物因而
使VFAs 浓度减少pH 出现上升的趋势
2反应器生物阴极出水 pH
Fig.2 The pH of the biocathode effluent
3.2 PNP 去除率的影响
对生物阴极降解 PNP 的效果也进行了检测
解产物检测结果表
不论以葡萄糖为碳源还是以
酸氢钠为碳源PNP 都被还原成对氨基苯酚
Wang et al20162018Glucose NaHCO3都具有
去除 PNP 的能力3在进水 PNP 浓度为 40
mg·L11 g·L1碳源的条件下Glucose PNP 去除
效果NaHCO3
12 h 24 h
Glucose PNP 去除率分别为 476%820%
NaHCO3PNP 去除率分别为 102%436%0 ~
24 h Glucose 中电流明显高于 NaHCO3
这也说明了
Glucose 有更高的电化学活性
因而具有更高的
PNP 去除
碳酸氢钠在生物阴极中降解
PNP 中只是作为生物阴极碳源而存在
电极为
PNP 还原提供所需的
而葡萄糖不仅可作为
还能作为电子供体提供更多的电子用作 PNP
原反应
葡萄糖作为碳源可以提供更多的电
子以PNP 原反应并且能够获得更高的生物量
为生物阴极碳源时 BES 表现出更加突出
PNP 去除能力
3不同碳源对 PNP 去除的影响
Fig.3 The effect of carbon source on PNP degradation
3.3 碳源转换对降解 PNP 的影响
工业废水处理面对的问题很多
例如水质
不稳定
因此
处理含 PNP 废水过程中生物阴极耐
碳源改变十分重要 NaHCO3的阴极外加碳源由碳
酸氢钠转
再转换为碳酸氢钠时
电势曲线几乎
Glucose 阴极外加碳源由葡萄
糖转换为
在转换为葡萄糖时
阴极电势
略有升高4ANaHCO3Glucose 中电流在碳源
转换过程中均呈下降的趋势4B这说明碳源转
换对阴极生物膜的冲击很大
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第40卷第10期2020年10月环境科学学报ActaScientiaeCircumstantiaeVol.40,No.10Oct.,2020收稿日期:2020-09-07修回日期:2020-09-25录用日期:2020-09-25基金项目:国家自然科学基金(No.51178140);城市水资源与环境项目(No.2013DX01)作者简介:王欣宇(1978—),女,E-mail:86384206@qq.com;责任作者,E-mail:rnq@hit.edu.cnDOI:10.13671/j.hjkxxb.2020.0419王欣宇,邢德峰,任南琪.2020.碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析[J].环境科学学报,40(10):3703-3709WangXY,XingDF,RenNQ.2020.EffectofcarbonsourceonPNPdegradationandbiocathodecommunitystructureinbioelectrochemicalsystem[J].ActaScientiaeCircumstantiae,40(10):3703-3709碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析王欣宇,邢德峰,任南琪城市水资源与水环境国家重点实验室,哈尔滨工业大学,哈尔滨150090摘要:研究不同碳源类型对双室生物电化学反应器(biocathodebioelectrochemicalsystem,BES)生物阴极(biocathode)降解对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)效能的影响.以碳酸氢钠和葡萄糖作为碳源,研究不同碳源类型下BES反应器效能和生物阴极的微生物群落结构.BES反应器效能和PNP去除率受到碳源类型的影响,以葡萄糖作为碳源时PNP去除率比碳酸氢钠为碳源的去除率在12h和24h分别提高了约3倍和1倍.RNaHCO3和RGlucose的PNP去除速率常数随碳源转换分别从(0.022±0.002)h-1和(0.059±0.009)h-1减小到(0.018±0.001)h-1和(0.042±0.002)h-1,PNP去除率分别下降了36%和6.9%.RNaHCO3和RGlucose的PNP降解速率常数在外加电压由0.5V转换为0V时分别下降到(0.004±0.00061)h-1和(0.007±0.0006)h-1,再次转换为0.5V时PNP降解速率常数升高到(0.022±0.002)h-1和(0.062±0.004)h-1.454-焦磷酸测序结果表明碳源类型导致阴极微生物群落结构的显著差异.以碳酸氢钠为碳源的生物阴极富集Proteobacteria,而以葡萄糖为碳源的生物阴极Firmicutes和Bacteroidetes成为优势菌门.关键词:生物电化学系统;碳源;生物阴极微生物群落结构;对硝基苯酚降解文章编号:0253-2468(2020)10-3703-07中图分类号:X172文献标识码:AEffectofcarbonsourceonPNPdegradationandbiocathodecommunitystructureinbioelectrochemicalsystemWANGXinyu,XINGDefeng,RENNanqiStateKeyLaboratoryofUrbanWaterResourceandEnvironment,HarbinInstituteofTechnology,Harbin150090Abstract:InordertodeterminetheeffectofcarbonsourceonthePNPdegradationefficiencyandmicrobialcommunitystructureofbiocathode,thesodiumbicarbonateandglucosewereusedascarbonsourceinthedoublechamberbioelectrochemicalsystem(BES).TheresultsshowedthatthecarbonsourcealteredtheperformanceofreactorsandPNPdegradation.ThePNPdegradationefficiencyusedglucosewere3timesand1timeshigherthanusedsodiumbicarbonateat12hand24h,respectively.ThePNPremovalrateconstantofRNaHCO3和RGlucosereducedfrom(0.022±0.002)h-1and(0.059±0.009)h-1to(0.018±0.001)h-1and(0.042±0.002)h-1andPNPremovalratedecreased36%and6.9%withcarbonswitchover.ThePNPdegradationrateconstantofRNaHCO3andRGlucosedecreasedto(0.004±0.00061)h-1and(0.007±0.0006)h-1respectivelywhentheappliedvoltagewasconvertedfrom0.5Vto0V,andthePNPdegradationrateconstantincreasedto(0.022±0.002)h-1and(0.062±0.004)h-1whentheappliedvoltagewasconvertedto0.5Vagain.Microbialcommunitystructuresofbiocathodeweresignificantlydifferentwithdifferentcarbonsource.Proteobacteriawasthedominantbacteriainthesodiumbicarbonatereactors,FirmicutesandBacteroideteswerethepredominantbacteriaintheglucosereactors.ThisstudyshowedthebasetechnologyofPNPdegradationinthefuture.Keywords:bioelectrochemicalsystem(BES);carbonsource;biocathodemicrobialcommunitystructure;p-nitrophenoldegradation1引言(Introduction)对硝基苯酚(p-nitrophenol,PNP)作为重要的工业品或原材料,广泛的应用于各种合成工业,同时也可以由杀虫剂降解产生,因此被美国环保属(EPA)列为控制优先污染物名单(Wuetal.,2015).因其在环境中难以被降解,因而对人类的健康存在巨大的危害(Taoetal.,2013).近几年来,在环境科学学报40卷河水、土壤、污水和地下水中都检测到了PNP的存在.由于PNP的毒性而导致的环境污染问题已经引起全球的关注.因此含PNP废水在排放前必须进行处理,以保护环境和人类的健康.生物电化学系统(bioelectrochemicalsystem,BES)能利用微生物产生不同的化学物质或者能量(WangandRen,2013),由于这项技术具有高效污染物去除能力、易于控制且环境友好的优点,因此受到了广泛的关注(Chenetal.,2016).BES耦合其他常规水处理技术已被用于PNP降解的研究(Shenetal.,2012;2014).生物阴极BES已被用来降解PNP.本实验室开展了以碳酸氢钠和葡萄糖作为底物降解PNP的研究,发现产物均为对氨基苯酚,都能获得较好的降解效果(Wangetal.,2016;2018).碳是生命必须的元素之一,生物阴极微生物生长需要碳源,因此碳源对微生物的种类影响很大(Toshifumietal.,2008).BES降解PNP的研究主要集中在PNP浓度、电流密度、底物浓度、水力停留时间和外电阻等的影响(Jiangetal.,2016;Shenetal.,2015).碳酸盐在生物阴极中是一种低成本的碳源,在实验室中葡萄糖也是常用的碳源之一.此外在不同底物的反应器中,碳源转换和电压转换对PNP去除率的影响目前研究很少.因此本研究探讨了碳酸氢钠和葡萄糖为底物的反应器对PNP的降解效能.利用双室生物阴极电化学反应器,研究有机碳源(葡萄糖)和无机碳源(碳酸氢钠)对PNP降解效能和阴极微生物群落结构的影响,碳源转换和电压转换对PNP去除的影响,为BES应用于PNP废水处理工程奠定理论基础.2材料和方法(Materialsandmethods)2.1反应器的构型本研究中采用H型双室玻璃反应器构建有机碳源(葡萄糖,RGlucose)和无机碳源(碳酸氢钠,RNaHCO3)生物阴极BES反应器.以阳离子交换膜(CMI7000,MembranesInternationalInc.,USA)分隔为阴极室和阳极室,每室有效体积为300mL.以碳刷作为电极,外电阻为10Ω,外加电压0.5V,Ag/AgCl电极作为参比电极(0.247VVSSHE,上海雷磁,中国)固定于阴极室(Wangetal.,2016).2.2反应器的启动及运行以哈尔滨文昌污水处理厂生活污水接种反应器的阴极和阳极.阳极液为1.67g·L-1乙酸钠,维生素母液(Luetal.,2012)和微量元素母液(LovleyandPhillips,1988)溶于50mmol·L-1磷酸盐缓冲液(KCL0.13g·L-1,NH4CL0.31g·L-1,Na2HPO44.58g·L-1,NaH2PO42.45g·L-1)中;阴极液采用人工配水,分别以碳酸氢钠和葡萄糖作为碳源,50mmol·L-1磷酸盐缓冲液,加入维生素母液和微量元素母液,加入20mg·L-1PNP作为目标污染物,培养温度为(25±2)℃.每个反应重复测定3次.完成1次碳源转换和电压转换后,反应器恢复7d,再进行试验.2.3分析和计算在浓度测试前,所有样品均通过0.45μm滤膜过滤.电压和阴极电势记录由Keithley2700数据记录仪(KeithleyCo.,Ltd.,USA)自动采集和保存,时间间隔为10min.电流根据欧姆定律进行计算.PNP浓度测定采用高效液相色谱法(model-e2695,WatersCo.,USA)(Wangetal.,2018).PNP去除率根据进水和出水PNP浓度差值进行计算.出水pH值使用pH计(PHS-2F,上海雷磁)测定.2.4生物阴极微生物群落结构分析取反应器阴极碳刷上生物膜提取总DNA.利用DNA试剂盒(PowerSoil,Mo-BIO,USA)提取样品总DNA,所得的DNA进行454-焦磷酸高通量测序分析(美吉生物),测序结果通过软件(QIIME)进行样品生物信息学分析(Wangetal.,2016;2018).3结果和讨论(Resultsanddiscussion)3.1BES反应器启动及底物对反应器性能的影响反应器阴极电势用来评估反应器启动情况.当反应器电流保持稳定,且阴极中黄色消失,此时表明BES反应器生物阴极启动成功.碳源对BES反应器电压和电流密度的影响如图1所示.碳源对阴极电势影响很小,RGlucose和RNaHCO3具有几乎相同的阴极电位且变化趋势基本相同,在达到稳定时都可达到-1.0V,这表明碳源对反应器的性能变化影响不大.而反应器中电流具有比较明显的改变.0~20h,电流都出现了波动,在20h后都基本稳定在0.38mA左右,但对于RGlucose从2h到16h存在一个较高的电流峰值,此时间段内RGlucose的电流要远高于RNaHCO3,最高达到2.3mA.这表明在2h到16h这段时间内RGlucose中具有更多的电子的产生,因而会有更多的电子用于PNP的还原反应,因此RGlucose具有高的电化学活性.407310期王欣宇等:碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析图1不同碳源类型下阴极电势和电流Fig.1Theeffectofcarbonsourceonthecathodepotentialandcurrent检测电流和阴极电势的同时,对反应器生物阴极出水的pH值也进行了检测.尽管阴极进液都使用了50mmol·L-1PBS,阴极出水的pH出现了完全相反的变化(图2).在RNaHCO3中的阴极出水pH呈碱性,在60h时达到7.4.而RGlucose阴极出水的pH则呈酸性,60h时为6.3.产生的主要原因是在RGlucose中葡萄糖被阴极微生物代谢产生了小分子挥发性有机酸(VFAs)而使pH降低.而pH在24h后会有缓慢的上升,这表明24h葡萄糖已完全被微生物代谢掉,随后阴极内的微生物以产物VFAs为底物因而使VFAs浓度减少,pH出现上升的趋势.图2反应器生物阴极出水pH值Fig.2ThepHofthebiocathodeeffluent3.2PNP去除率的影响对生物阴极降解PNP的效果也进行了检测.降解产物检测结果表明,不论以葡萄糖为碳源还是以碳酸氢钠为碳源,PNP都被还原成对氨基苯酚(Wangetal.,2016;2018).RGlucose和RNaHCO3都具有去除PNP的能力(图3).在进水PNP浓度为40mg·L-1时,1g·L-1碳源的条件下,RGlucose的PNP去除效果要明显高于RNaHCO3.其中,在12h和24h时RGlucose中PNP去除率分别为47.6%和82.0%,而在RNaHCO3中PNP去除率分别为10.2%和43.6%.在0~24h中RGlucose中电流明显高于RNaHCO3,这也说明了RGlucose具有更高的电化学活性,因而具有更高的PNP去除效果.此外,碳酸氢钠在生物阴极中降解PNP过程中只是作为生物阴极碳源而存在,电极为PNP还原提供所需的电子,而葡萄糖不仅可作为碳源,还能作为电子供体提供更多的电子用作PNP还原反应,因此,葡萄糖作为碳源可以提供更多的电子以供PNP还原反应并且能够获得更高的生物量.葡萄糖作为生物阴极碳源时BES表现出更加突出的PNP去除能力.图3不同碳源对PNP去除的影响Fig.3TheeffectofcarbonsourceonPNPdegradation3.3碳源转换对降解PNP的影响实际工业废水处理面对的问题很多,例如水质不稳定,因此,处理含PNP废水过程中生物阴极耐受碳源改变十分重要.RNaHCO3的阴极外加碳源由碳酸氢钠转换为葡萄糖,再转换为碳酸氢钠时,阴极电势曲线几乎不变,而RGlucose阴极外加碳源由葡萄糖转换为碳酸氢钠,在转换为葡萄糖时,阴极电势略有升高(图4A).而RNaHCO3和RGlucose中电流在碳源转换过程中均呈下降的趋势(图4B).这说明碳源转换对阴极生物膜的冲击很大.5073环境科学学报40卷RNaHCO3和RGlucose的PNP去除速率常数随碳源转换分别从(0.022±0.002)h-1和(0.059±0.009)h-1减小到(0.018±0.001)h-1和(0.042±0.002)h-1,PNP去除率分别下降了36%和6.9%(表1).碳源转换对于生物膜来说是营养含量不足,不利于微生物的生长,因此生物阴极无法充分发挥PNP降解的能力.合适的碳源对阴极微生物生长代谢提供足够的能量,因而增强了PNP的去除.生物阴极BES系统在碳源转换后仍具有对PNP的降解能力,这也证明外加电压对PNP降解的重要作用.生物阴极中碳源转换能够改变微生物群落结构及功能基因密度(Liangetal.,2014),充分说明生物阴极在不同碳源条件下具有良好的适应能力和PNP降解能力.图4碳源转换时PNP降解过程中阴极电势(a)和电流(b)Fig.4Thecathodepotential(a)andcurrent(b)ofcarbonsourceswitchoverofPNPdegradation表1碳源转换对PNP降解的影响Table1TheeffectofcarbonsourceswitchoveronPNPdegradation反应器k/(h-1)R2DEPNP(36h)RNaHCO3-NaHCO30.022±0.0020.9581.3%±3.4%RNaHCO3-Glucose0.018±0.0010.9152.0%±2.9%RGlucose-Glucose0.062±0.0040.9995.5%±1.7%RGlucose-NaHCO30.042±0.0020.9388.9%±2.1%3.4外加电压转换降解PNP外加电压能够改变BES中电流和离子迁移速率,对PNP去除效率产生影响较大.外加电压转换下阴极电势和电流如图5所示.阴极电势随着外加电压降低而升高.当外加电压为0V时,RNaHCO3和RGlucose36h时阴极电势都由-1.0V升高到-0.45V,外加电压转换为0.5V时,RNaHCO3阴极电势下降到-1.0V,而RGlucose阴极电势下降到-0.82V.电流变化随外加电压而改变,当外加电压为0V时,电流几乎为0,而外加电压为0.5V时,系统中电流也随着升高.这表明电压转换对RGlucose的阴极生物膜有影响.以往的研究表明外加电压在BES降解体系中起着重要的作用,电场的存在为BES系统提供一个更简化的微环境,为电子供体在还原过程中提供驱动力,这是提高反应器降解PNP性能的关键(Wangetal.,2017).当外加电压从0.5V转换为0V时,RNaHCO3和RGlucose的PNP降解速率常数k分别下降到(0.004±0.00061)h-1和(0.007±0.0006)h-1,再次转换为0.5V时RNaHCO3和RGlucose的PNP降解速率常数k分别升高到0.022±0.002h-1和0.062±0.004h-1.外加电压为0V时,RNaHCO3和RGlucose的PNP去除率(36h)分别下降到17.1%±1.7%和26.7%±2.4%(图6).表明单独存在的阴极生物膜对PNP也具有降解功能.当电压再次升高到0.5V时,RNaHCO3和RGlucose的PNP去除率升高到79.4%±3.7%和89.2%±6.4%.而这表明外加电压在生物阴极BES降解PNP中起到了重要的作用.阴极电位降低表明阴极生物膜活性受到了影响.BES的外加电压对PNP降解是必要的,外加电压提高了系统中电流,使PNP在阴极更快速的被还原.外加电压为0V时,此时系统中没有电流,这些结果表明外加电压能够促进PNP的降解.当外加电压为0V时,(图6),36h时RNaHCO3和RGlucosePNP去除率为17.1%±1.75%和26.7%±607310期王欣宇等:碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析2.4%,而此时电流密度很低,接近于0(图6).这表明此时PNP的还原由阴极中的微生物完成的.由此可知,外加电压的存在能够促进电子转移,促进阴极生物膜的催化功能.对比0.5V电压时PNP去除率,可推测在低电压下对阴极生物膜的损害作用小于高电压,因此,在生物阴极实际应用中应该更加重视外加电压的调节和控制.图5电压转换PNP降解过程中阴极电势和电流的变化Fig.5TheeffectofappliedvoltageswitchoveroncathodepotentialandcurrentduringPNPdegradation图6电压为0V时及再转换为0.5V时PNP去除速率常数及PNP去除率Fig.6ThePNPdegradationconstantrateandPNPdegradationefficiencyatappliedvoltageof0Vandconvertto0.5V3.5碳源类型对微生物群落结构的影响生物阴极可以被定义为由廉价的材料制成,微生物作为催化剂来催化阴极的反应.目前大量的研究表明微生物群落结构决定了阴极的效能,因此测定阴极微生物群落结构能更好的理解电流及PNP去除率的差异.测序结果表明在不同碳源存在下,阴极微生物群落结构和相对丰度存在显著差异.在门水平上(图7),在RNaHCO3中优势门为Proteobacteria(85.6%),而在RGlucose中优势门为Firmicutes(60.4%)和Bacteroidetes(31.9%).图7门水平热图Fig.7Theheatmapatthegenuslevel图8属水平venn图Fig.8Thevennofgenus在属水平上对阴极微生物群落结构进行比较,有助于更好的理解碳源的作用.在RNaHCO3和RGlucose中存在32个相同的属(图8),相对于RGlucose的72个属,在RNaHCO3中获得了更多的属(136个).这表明RNaHCO3中具有更复杂的群落结构.表2在RNaHCO3和RGlucose生物阴极中相对丰度大于5%的8个属,RNaHCO3中富集到优势菌属为Delftia、Diaphorobacter、Aquamicrobium和Raoultella,相对丰度总和为56%,而这4个属在RGlucose中的相对丰度和仅为0.5%.在RGlucose中富集到的优势菌属为Streptococcus、Lactococcus、Dysgonomonas和Bacteroides,相对丰度总7073环境科学学报40卷和为84.6%,相对应在RNaHCO3中这4个属的相对丰度总和是0.05%.这表明生物阴极微生物群落结构和类型受到碳源类型的影响.Delftia和Diaphorobacter菌属具有细胞外电子转移能力(Yaminietal.,2016).在RGlucose中优势属Dysgonomonas的能发酵葡萄糖(Luetal.,2012),并与电流产生相关(Watanabeetal.,2011).已有研究表明,在产生氢气的生物阴极MEC中,阴极群落结构受很多因素的影响(如构型、营养分布和流动路径等,碳源也是其中一个因素(Croeseetal.,2014).本研究中,由于反应器构型和接种物相同,因而碳源种类成为了形成完全不同的阴极微生物群落的主要因素,不同的阴极微生物群落导致了生物阴极对PNP降解能力的差异和反应器效能的差异.因此,碳源也是影响生物阴极群落结构和效能的重要因素之一.RNaHCO3中生物阴极生物膜的碳源来自于碳酸氢钠,而能量只能来源于电极,因此PNP还原所需的电子只能从阴极获得,因此反应器RNaHCO3生物阴极生物膜在PNP还原过程中起到将电子从电极传递给PNP的作用.而在RGlucose中生物阴极功能除将电子从电极转移到PNP外,溶液中游离的微生物还能利用葡萄糖产生额外电子供PNP还原作用,因此RGlucose获得了远高于RNaHCO3的PNP降解效率.PNP对微生物具有抑制作用(Carreraetal.,2011),以葡萄糖作为碳源获得了更大的阴极生物量且电极不是唯一的电子供体(Wangetal.,2018),因而在面对碳源转换和电压转换时具有更快的适应能力和更好的效能.表2属水平生物阴极微生物群落结构分析(相对丰度大于5%)Table2Theanalysisofmicrobialcommunitiesofdifferentcarbonsourceatgenuslevel(therelativeabundanceover5%)菌属RNaHCO3RGlucoseRaoultella5.2%0.3%Aquamicrobium6.4%0Delftia26.0%0.2%Diaphorobacter18.4%0Dysgonomonas015.0%Lactococcus015.4%Streptococcus0.05%42.8%Bacteroides011.4%4结论(Conclusions)1)碳源类型对反应器性能影响很大,葡萄糖作为碳源获得更高的反应器效能.2)碳源类型影响PNP去除率,在以葡萄糖为碳源时获得了更高的PNP去除效率,在12h和24h时是以碳酸氢钠为碳源时的4倍和2倍.3)PNP降解速率随着碳源改变而改变,碳源由碳酸氢钠变成葡萄糖时,PNP降解率下降.外加电压在PNP降解过程中起重要作用.以葡萄糖为底物的生物阴极BES能够更好的耐受碳源和电压的转换.4)在相同的接种物和反应器运行条件下,碳源类型对生物阴极微生物群落结构有显著影响.在门水平上,以碳酸氢钠为底物的生物阴极主要为Proteobacteria,而以葡萄糖为底物的生物阴极主要为Firmicutes和Bacteroidetes.参考文献(References):CarreraJ,Martin-HernandedM,Suarez-OjedaME,etal.2011.ModellingthepHdependenceofthekineticsofaerobicp-nitrophenolbiodegradation[J].JournalofHazardousMaterials,186:1947-1953ChenD,WangHY,YangK.2016.Effectivebiodegradationofnitrate,Cr(VI)andp-fluoronitrobenzenebyanovelthreedimensionalbioelectrochemicalsystem[J].BioresourceTechnology,203:370-373CroeseE,JeremiasseAW,MarshallI,etal.2014.Influenceofsetupandcarbonsourceonthebacterialcommunityofbiocathodesinmicrobialelectrolysiscells[J].EnzymeandMicrobialTechnology,61-62:67-75JiangXB,ShenJY,LouS,etal.2016.Comprehensivecomparisonofbacterialcommunitiesinamembrane-freebioelectrochemicalsystemforremovingdifferentmononitrophenolsfromwastewater[J].BioresourceTechnology,216:645-652LiangB,ChengHY,NostrandJDV,etal.2014.MicrobialcommunitystructureandfunctionofNitrobenzenereductionbiocathodeinresponsetocarbonsourceswitchover[J].WaterResearch,54:137-148LovleyDR,PhillipsEJP.1988.Novelmodeofmicrobialenergy-metabolism-organic-carbonoxidationcoupledtodissimilatoryreductionofironormanganese[J].AppliedandEnvironmentalMicrobiology,54(6):1472-1480LuL,XingDF,RenNQ,etal.2012.Syntrophicinteractionsdrivethehydrogenproductionfromglucoseatlowtemperatureinmicrobialelectrolysiscells[J].BioresourceTechnology,124:68-76ShenJY,FengCC,ZhangYY,etal.2012.Bioelectrochemicalsystemforrecalcitrantp-nitrophenolremoval[J].JournalofHazardousMaterials,209-210:516-519ShenJY,ZhangYY,XuXP,etal.2013.Roleofmolecularstructure807310期王欣宇等:碳源对生物阴极降解对硝基苯酚效能及生物阴极群落结构分析onbioelectrochemicalreductionofmononitrophenolsfromwastewater[J].WaterResearch,47:5511-5519ShenJY,XuXP,JiangXB,etal.2014.Couplingofabioelectrochemicalsystemforp-nitrophenolremovalinanupflowanaerobicsludgeblanketreactor[J].WaterResearch,67:11-18TaoHC,WeiXY,ZhangLJ,etal.2013.Degradationofp-nitrophenolinaBES-Fentonsystembasedonlimonite[J].JournalofHazardousMaterials,254-255:236-241ToshifumiO,KosukeS,SachikoY,etal.2008.Effectsofcarbonsourceondenitrificationefficiencyandmicrobialcommunitystructureinasalinewastewatertreatmentstructure[J].WaterResearch,42:3709-3718WangDX,HangHJ,HanYX,etal.2017.EnhancedtreatmentofFischer-Tropsch(F-T)wastewaterusingtheup-flowanaerobicsludgeblanketcoupledwithbioelectrochemicalsystem:Effectofelectricfield[J].BioresourceTechnology,232:18-26WangHM,RenZJ.2013.Acomprehensivereviewofmicrobialelectrochemicalsystemsasaplatformtechnology[J].BiotechnologyAdvances,31:1796-1807WangXY,XingDF,MeiXX,etal.2018.Glucoseandappliedvoltageacceleratedp-nitrophenolreductioninbiocathodeofbioelectrochemicalsystems[J].FrontiersinMicrobiology,9:580WangXY,XingDF,RenNQ.2016.p-Nitrophenoldegradationandmicrobialcommunitystructureinabiocathodebioelectrochemicalsystem[J].RSCAdvances,6:89821-89826WatanabeK,MiyaharaM,ShimoyamaT,etal.2011.Populationdynamicsandcurrent-generationmechanismsincassette-electrodemicrobialfuelcells[J].AppliedMicrobiologyandBiotechnology,92(6):1307-14WuZB,YuanXZ,ZhongH,etal.2016.Enhancedadsorptiveremovalofp-nitrophenolfromwaterbyaluminummetal–organicframework/reducedgrapheneoxidecomposite[J].ScientificReports,6(1):25638YaminiJ,SarahF,MomperLM,etal.2016.Isolationandcharacterizationofelectrochemicallyactivesubsurfacedelftiaandazonexusspecies[J].FrontiersinMicrobiology,7:756ZhangLB,ShenJY,XuKC,etal.2016.Enhancedbioelectrochemicalreductionofp-nitrophenolsinthecathodeofself-drivenmicrobialfuelcells[J].RSCadvances,6:29072-290799073

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